我们提供最全面的组蛋白修饰研究产品选择,涵盖实验工作流程的每一步,从上游到下游。

组蛋白修饰研究

组蛋白甲基化组蛋白是真核生物染色质的主要蛋白质组分,在基因调控中发挥作用。H3和H4组蛋白具有从核小体突出的尾部,其可以在转录后被修饰以改变组蛋白与DNA和核蛋白的相互作用,从而导致用于调节许多正常和疾病相关过程的表观遗传变化。EpiGentek提供了一个完整的系列试剂盒,可用于量化所有位点的H3组蛋白的甲基化,乙酰化和磷酸化。

组蛋白甲基化

被称为组蛋白甲基化的机制是一种翻译后表观遗传修饰,其涉及通过组蛋白甲基转移酶(HMT)将甲基转移到组蛋白。甲基基团被添加到从组蛋白蛋白突出的“尾部”,这是翻译后修饰的最常见位置,尤其是N-末端尾部。或者,组蛋白去甲基化是由组蛋白去甲基酶(HDM)催化的从组蛋白尾部去除甲基。组蛋白甲基化和组蛋白去甲基化是表观遗传修饰,其具有减少或支持基因表达的能力,特别是作为改变染色质结构的结果。

组蛋白是一种有助于构成染色质结构的蛋白质,其由DNA包裹的蛋白质八聚体组成。这些八聚体由四个核心组蛋白(H2A,H2B,H3和H4)的重复组成。这个染色质单位通常被称为核小体。由于染色质结构的松动或限制,组蛋白甲基化或去甲基化可导致转录抑制或激活。异染色质和常染色质是指染色质结构,分别是紧密或松散包装在组蛋白周围的DNA。异染色质在转录上是不活跃的,而常染色质在转录上是活跃的。

在组蛋白上添加甲基的位置和数量在很大程度上决定了染色质是否可用于转录。尾部残基-赖氨酸(K)和精氨酸(R)-可以不同程度地甲基化,具有不同的结果。例如,当组蛋白H4在赖氨酸20(H4 K20 me 1)上单甲基化时,这种常见的组蛋白修饰导致染色质收缩。限制染色质结构阻止转录发生并减少基因表达。或者,组蛋白H3在精氨酸17(H3 R17 me 1)上的单甲基化导致转录激活。

赖氨酸甲基化参与转录激活(H3K4、K36、K79)以及沉默(H3K9、K27、H4K20)。因此,研究这些修饰的影响将使研究人员能够更好地了解不同数量的甲基转移或去除到各种赖氨酸或精氨酸残基将如何影响基因表达。“组蛋白密码”试图描述组蛋白修饰以各种组合方式一起发挥作用以控制某些细胞过程的方式。

通过测量组蛋白修饰,研究人员可以发现细胞过程和疾病状态的新表观遗传学见解。例如,异常修饰与许多不同的疾病有关,从癌症到自身免疫性疾病以及炎症和神经系统疾病。除了更好地理解病理疾病过程的表观遗传基础外,检测组蛋白修饰还可以帮助开发组蛋白修饰靶向药物。

组蛋白乙酰化

组蛋白乙酰化是一种表观遗传修饰,其特征在于将乙酰基添加到组蛋白,特别是添加到N-末端尾内的赖氨酸残基。这种组蛋白修饰由称为组蛋白乙酰转移酶(HAT)的酶催化。两种不同类型的HAT-细胞质和细胞核-基于细胞内位置和组蛋白特异性来确定。或者,组蛋白脱乙酰酶(HDAC)在称为组蛋白脱乙酰化的过程中起去除乙酰基的作用。

与其他组蛋白修饰类似,组蛋白乙酰化/去乙酰化通过使DNA或多或少地可用于转录来影响染色质结构,进而影响基因表达。赖氨酸残基的乙酰化导致转录活性的染色质结构(常染色质),脱乙酰化导致非活性的浓缩染色质结构(异染色质)。

HDAC主要分为四类:I类、II类、III类和IV类。HDAC 1、HDAC 2、HDAC 3和HDAC 8属于I类。HDAC4、HDAC5、HDAC6、HDAC7、HDAC9和HDAC10属于II类。七种sirtuins,包括SIRT1至SIRT7,属于III类。最后,第IV类仅由HDAC 11组成。这些分类是基于它们与酵母蛋白的同源性。

通过研究组蛋白乙酰化和去乙酰化,研究人员可以更深入地了解“组蛋白密码”。这项研究也有助于HDAC靶向药物的开发。例如,组蛋白去乙酰化酶抑制剂(HDACi)通常用作情绪稳定剂和抗癫痫药。它们也被用作可能的癌症神经退行性疾病和炎症性疾病的治疗。有趣的是,已知HDAC抑制剂对肿瘤细胞具有特异性,这解释了它们作为抗癌药物的广泛用途。

组蛋白磷酸化

组蛋白磷酸化是影响丝氨酸、苏氨酸和酪氨酸残基的翻译后修饰。它涉及在组蛋白尾部添加一个磷酰基,这可以在染色质重塑中发挥作用。所有四个核小体组蛋白尾部都可能被磷酸化。组蛋白磷酸化最著名的功能之一涉及对DNA损伤的细胞反应。虽然已经发现了许多磷酸化位点,但正在进行的表观遗传学研究正在发现新的位点。

组蛋白研究步骤详情

组蛋白提取

EpiQuik总组蛋白提取试剂盒使研究人员能够在短短一小时内可靠方便地从哺乳动物细胞或组织中分离组蛋白。这些试剂盒被推荐用于制备组蛋白提取物,用于EpiGentek的组蛋白修饰检测试剂盒或用于组蛋白乙酰化、甲基化、磷酸化和SUMO化的各种下游应用。

目录号
名称
描述
OP-0006
EpiQuik总组蛋白提取试剂盒
用于分离具有完整翻译后修饰(PTM)的组蛋白
OP-0007
EpiQuik总组蛋白提取HT试剂盒
用于从96孔板上培养的哺乳动物细胞中分离组蛋白

核提取

EpiQuik核提取试剂盒使研究人员能够在短短一小时内可靠方便地从细胞或组织中分离核蛋白。提取物可用于EpiGentek

目录号
名称
描述
OP-0002
EpiQuik核提取试剂盒
用于从细胞或组织中分离和提取核蛋白,同时保持酶活性完整
OP-0022
EpiQuik核提取试剂盒II(无核酸)
用于从细胞或组织中分离无核酸核蛋白,同时保持酶活性完整

组蛋白H3 H4多重测定

使用EpiQuik组蛋白H3和H4修饰多重检测试剂盒,您可以全面了解样品的组蛋白修饰状态。这种类似ELISA的方法只需要一个标准的酶标仪。通过同时测量21种不同的组蛋白H3修饰、10种不同的组蛋白H4修饰或22种不同的循环组蛋白H3修饰,节省保存时间和金钱。这些工具包中的每一个都包括所有最重要和最具特征的模式。

目录号
名称
描述
P-3100
EpiQuik组蛋白H3修饰多重检测试剂盒
用于在同一平板上对21种不同组蛋白H3修饰模式进行ELISA样定量
P-3102
EpiQuik组蛋白H4修饰多重检测试剂盒
用于在同一平板上对10种不同组蛋白H4修饰进行ELISA样定量
P-3106
EpiQuik循环修饰组蛋白H3多重检测试剂盒
对于同一平板上22种不同循环组蛋白H3修饰的ELISA样定量

组蛋白定量

定量组蛋白甲基化或乙酰化对于研究基因表达模式特别有用。EpiGentek提供了一个完整系列的ELISA样试剂盒,以定量H3或H4甲基化或乙酰化在特定的赖氨酸在比色和荧光版本。

组蛋白H3和H4甲基化定量试剂盒包括:(* 荧光版本)

组蛋白 目录号 组蛋白 目录号 组蛋白 目录号 组蛋白 目录号
H3K4me1 P-3024 H3K9me3 P-3034 H3K36me1 P-3046 H3K79me3 P-3058
H3K4me1* P-3025 H3K9me3* P-3035 H3K36me1* P-3047 H3K79me3* P-3059
H3K4me2 P-3022 H3K9Pan P-3036 H3K36me2 P-3048 H3K79Pan P-3060
H3K4me2* P-3023 H3K9Pan* P-3037 H3K36me2* P-3049 H3K79Pan* P-3061
H3K4me3 P-3026 H3K27me1 P-3038 H3K36me3 P-3050 H4K20me1 P-3064
H3K4me3* P-3027 H3K27me1* P-3039 H3K36me3* P-3051 H4K20me1* P-3065
H3K4Pan P-3028 H3K27me2 P-3040 H3K36Pan P-3052 H4K20me2 P-3066
H3K4Pan* P-3029 H3K27me2* P-3041 H3K36Pan* P-3053 H4K20me2* P-3067
H3K9me1 P-3030 H3K27me3 P-3042 H3K79me1 P-3054 H4K20me3 P-3068
H3K9me1* P-3031 H3K27me3* P-3043 H3K79me1* P-3055 H4K20me3* P-3069
H3K9me2 P-3032 H3K27Pan P-3044 H3K79me2 P-3056 H4K20Pan P-3070
H3K9me2* P-3033 H3K27Pan* P-3045 H3K79me2* P-3057 H4K20Pan* P-3071

组蛋白H3和H4乙酰化定量试剂盒包括:(* 荧光版本)

组蛋白 目录号 组蛋白 目录号 组蛋白 目录号 组蛋白 目录号
H3K9ac P-4010 H3K18ac* P-4015 H3K56ac* P-4021 H4K12ac P-4028
H3K9ac* P-4011 H3K27ac P-4059 H4K5ac P-4022 H4K12ac* P-4029
H3K14ac P-4012 H3K36ac P-4018 H4K5ac* P-4023 H4K16ac P-4026
H3K14ac* P-4013 H3K36ac* P-4019 H4K8ac P-4024 H4K16ac* P-4027
H3K18ac P-4014 H3K56ac P-4020 H4K8ac* P-4025

查看更多组蛋白H3和H4甲基化或乙酰化定量试剂盒

组蛋白乙酰转移酶(HAT)和组蛋白脱乙酰酶(HDAC)

蛋白质乙酰化和去乙酰化之间的平衡控制着几个生理和病理细胞过程。研究参与维持这种平衡的酶-组蛋白乙酰转移酶(HAT)和组蛋白脱乙酰酶(HDAC)。我们有试剂盒可以快速测量HAT活性或定量整个HDAC家族中的任何一种(1-11)。

目录号
名称
描述
P-4003
EpiQuik HAT活性/抑制测定试剂盒
安全快速地测量组蛋白乙酰转移酶活性/抑制
P-4034
P-4035*
Epigenase HDAC活性/抑制直接测定试剂盒(* 荧光版)
测量核提取物或纯化的HDAC同种型(HDAC 1-11)中HDAC酶的总活性/抑制
参见目录号
EpiQuik HDAC 1 – 7检测试剂盒
通过ELISA样方法定量测定HDAC 1-11蛋白的总量

组蛋白甲基转移酶(HMT)脱甲基酶

赖氨酸甲基化标记组蛋白尾部和球状结构域上的各种位置,并且它们的水平通过甲基转移酶(“写入器”)和去甲基酶(“擦除器”)特异性地平衡。使用我们方便的ELISA样测定法研究组蛋白甲基转移酶(HMT)或脱甲基酶的功能,该测定法可直接测量纯化酶样品的细胞核提取物的HMT或组蛋白脱甲基酶活性水平。

组蛋白甲基转移酶(HMT)检测包括:

目录号
名称
描述
P-3002
EpiQuik组蛋白甲基转移酶活性/抑制测定试剂盒(H3 K4)
测量特异性靶向组蛋白H3赖氨酸4的HMT的活性
P-3003
EpiQuik组蛋白甲基转移酶活性/抑制测定试剂盒(H3 K9)
测量特异性靶向组蛋白H3赖氨酸9的HMT的活性
P-3005
EpiQuik组蛋白甲基转移酶活性/抑制测定试剂盒(H3 K27)
测量特异性靶向组蛋白H3赖氨酸27的HMT的活性
P-3088
Epigenase PRMT甲基转移酶(II型特异性)活性/抑制测定试剂盒
使用核提取物或纯化的酶测量总II型PRMT的活性

组蛋白脱甲基酶测定包括:(* 荧光测定版)

目录号
名称
描述
P-3078
P-3079*
Epigenase LSD 1脱甲基酶活性/抑制测定试剂盒
通过直接检测LSD 1转化的去甲基化产物来测量LSD 1活性
P-3080
P-3081*
Epigenase JMJD 2脱甲基酶活性/抑制测定试剂盒
通过直接检测JMJD2转化的脱甲基化产物来测量JMJD2活性
P-3082
P-3083*
Epigenase JARID脱甲基酶活性/抑制测定试剂盒
通过直接检测JARID转化的去甲基化产物来测量JARID活性
P-3084
P-3085*
Epigenase JMJD 3/UTX脱甲基酶活性/抑制测定试剂盒
通过直接检测JMJD 3/UTX转化的去甲基化产物来测量JMJD 3或UTX活性

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